論文開題報(bào)告：絲素/聚乳酸復(fù)合支架生物學(xué)評價(jià)

目錄/提綱：……
1、稀釋抗凝兔血的制備：取新鮮兔血，加2%草酸鉀制備新鮮抗凝兔全血
4、凝血實(shí)驗(yàn)操作：在膜材和空白蓋玻片上滴加兔血和氯化鈣
三、復(fù)合支架生長因子釋放能力測試：
1、溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)曲線
2、絲素中溶菌酶載藥量對支架中溶菌酶釋放的影響
3、溶菌酶在不同載入模式下對支架中溶菌酶釋放的影響
……

大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))開題報(bào)告
學(xué)院：化工學(xué)院 　專業(yè)班級：2009級 制藥工程一班

課題名稱 絲素/聚乳酸復(fù)合支架生物學(xué)評價(jià)

1、本課題的的研究目的和意義：
目的：通過細(xì)胞毒性檢測、全身急性毒性反應(yīng)、溶血試驗(yàn)及動(dòng)態(tài)凝血時(shí)間試驗(yàn)等評價(jià)絲素/聚乳酸復(fù)合支架的生物安全性，為該材料臨床應(yīng)用的安全性提供有價(jià)值的理論依據(jù)。
意義：為絲素/聚乳酸復(fù)合支架作為生物材料的合理性提供根據(jù)，說明該復(fù)合支架具有良好的生物相容性，可用于臨床推廣。
2、文獻(xiàn)綜述（國內(nèi)外研究情況及其發(fā)展）
聚乳酸是人體的可降解高分子合成聚合物材料，具有優(yōu)異的力學(xué)性能和良好的生物相容性。絲素蛋白具有良好的生物相容性和可調(diào)生物降解率、細(xì)胞粘附性高等優(yōu)點(diǎn)。絲素/聚乳酸復(fù)合材料制備的多孔支架，具有良好的細(xì)胞親和性、生物相容性、機(jī)械強(qiáng)度和可調(diào)生物降解速率等一系列特點(diǎn)。
絲素-聚乳酸復(fù)合支架具有良好的生物相容性，根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)用支架浸提液培養(yǎng)L929細(xì)胞，檢測支架的細(xì)胞毒性。采用支架的浸提液作實(shí)驗(yàn)組，與對照組進(jìn)行24小時(shí)急性全身反應(yīng)。同時(shí)考察了溶血試驗(yàn)和動(dòng)態(tài)凝血實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)過程，可能由
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上接種一定數(shù)量的細(xì)胞，加以浸提液培養(yǎng)，觀察細(xì)胞的生長情況。取生理鹽水制備的支架浸提液，對小鼠尾端靜脈注射，24小時(shí)內(nèi)觀察老鼠，稱量小鼠體重。
1、浸提液的制備：做復(fù)合支架切片，用高糖培養(yǎng)基在37℃下浸提72 h，然后0.22μm濾膜滅菌。
2、細(xì)胞懸液的制備：取L929細(xì)胞培養(yǎng)，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度在1*106個(gè)/mL。將細(xì)胞懸液接種于96孔板上，培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24后，棄去原液，向各組分別加入
不同濃度的浸提液200μL。
3、Alamar blue法檢測：用酶聯(lián)免疫檢測儀測定吸光度，比較得到實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞相對增值率。
4、浸提液的制備：將多孔絲素/聚乳酸復(fù)合支架磨成粉末，以2.0 g材料加生理鹽水10 ml的比例，37℃水浴箱72小時(shí)，制備標(biāo)準(zhǔn)浸提液，然后用0.22μm的濾膜過濾除菌。
5、急性反應(yīng)：取小鼠60只，浸提液動(dòng)物尾靜脈注射，注射后24h、48h和72h稱量體重變化，觀察一般狀態(tài)、毒性表現(xiàn)和死亡情況。
三、復(fù)合支架生長因子釋放能力測試：
1、溶菌酶標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2、絲素中溶菌酶載藥量對支架中溶菌酶釋放的影響。
3、溶菌酶在不同載入模式下對支架中溶菌酶釋放的影響。
6、本課題的進(jìn)度安排：
2013.2.15-2013.2.25 查閱國內(nèi)外文獻(xiàn)，確定論文方向，訂購相關(guān)試劑。
2013.2.26-2013.3.15 學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)儀器操作，解決實(shí)驗(yàn)過程中的關(guān)鍵問題。
2013.3.16-2013.4.29 開展實(shí)驗(yàn)工作。
2013.5.1-2013.5.15 整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，開展補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)，完善論文。
2013.5.16-2013.5.26 撰寫論文，準(zhǔn)備答辯。
7、參考文獻(xiàn)
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[5] 張潤, 鄧政興, 李立華, 周長忍. 用超臨界CO2法制備聚乳酸三維多孔支架材料[J]. 材料研究學(xué)報(bào), 2003, 17(06): 665-672.
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[7] Hou C, Yuan Q, Huo D, et al. Investigation on clotting and hemolysis characteristics of heparin-immobilized polyether sulfones biomembrane. Journal of Biomedical Materials Research Part A, 2008, 85(3): 847~852
[8] Wang J, Hu W, Liu Q, et al. Dual-functional composite with anticoagulant and antibacterial properties based on heparinized silk ……（未完，全文共4525字，當(dāng)前僅顯示2285字，請閱讀下面提示信息。收藏《論文開題報(bào)告：絲素/聚乳酸復(fù)合支架生物學(xué)評價(jià)》）