畢業(yè)論文：蜂膠的免疫增強(qiáng)作用及在疫苗佐劑中的應(yīng)用綜述

畢業(yè)論文：蜂膠的免疫增強(qiáng)作用及在疫苗佐劑中的應(yīng)用綜述

摘要： 蜂膠作為一種天然的生物活性物質(zhì)，化學(xué)成分復(fù)雜，具有廣泛的生物學(xué)作用，特別在抗菌、抗病毒及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等方面具有顯著的生物活性，是疫苗佐劑的良好原材料。相對(duì)于傳統(tǒng)佐劑，蜂膠具有綠色天然，安全可靠，副作用小，來(lái)源豐富，成本低廉的優(yōu)勢(shì)。因此，近年來(lái)，對(duì)于蜂膠的免疫增強(qiáng)作用及其在疫苗佐劑中的應(yīng)用研究不斷深入，并在畜禽用疫苗的實(shí)驗(yàn)中取得了滿意效果，為新型有效疫苗的研制和開發(fā)提供了新的發(fā)展思路。

關(guān)鍵詞 蜂膠；疫苗；佐劑；免疫增強(qiáng)；

1. 前言
1.1 現(xiàn)狀
大多數(shù)疫苗中所含的醇化抗原，不能自行引起強(qiáng)大的免疫應(yīng)答，存在抗原性弱、直接接種該類疫苗只能引起緩慢的弱免疫應(yīng)答的問(wèn)題，無(wú)法達(dá)到有效預(yù)防接種目的。對(duì)于抗原性更弱的新一代基因工程疫苗如重組亞單位和粘膜疫苗，這個(gè)問(wèn)題更為嚴(yán)重。鑒于在分子水平上改造抗原提高其抗原性的方法，在成本效率層面上都難以讓人滿意，目前的解決方案是在疫苗中加入免疫佐劑提高疫苗整體的抗原性，從而增強(qiáng)免疫應(yīng)答。
1.2 常用疫苗佐劑及問(wèn)題
目前國(guó)內(nèi)外廣泛使用的鋁膠類等無(wú)機(jī)物佐劑、油乳類化學(xué)性免疫增強(qiáng)劑以及微生物來(lái)源佐劑有副作用大、局部刺激強(qiáng)、致癌、制備和使用不便、不能充分提高弱杭原的抗原性等弊端。因此，研制高效、低毒的新型免疫增強(qiáng)劑已成為亟待解決的問(wèn)題
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敘述是：“主治癰腫不消，為末，醋調(diào)涂之，干更易之。不入服食，藥性療療腫瘡毒”[ 、 ]。由于蜂膠的化學(xué)成分復(fù)雜，分離和鑒定技術(shù)落后，在相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)沒(méi)有得到很好的研究與開發(fā)利用。直到1909年，亞歷山大羅夫發(fā)表了《蜂膠是藥》的論文后，蜂膠才真正引起了人們的重視。在隨后的時(shí)間里，人們對(duì)蜂膠的研究和應(yīng)用逾加深入和廣泛[ ]。
2.4 主要成分
蜂膠是蜜蜂用來(lái)防護(hù)、抵御病蟲害和病原微生物入侵巢房的御敵物質(zhì)，同時(shí)也是作為修補(bǔ)巢房和內(nèi)環(huán)境消毒殺菌的一種特殊物質(zhì)，應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)機(jī)等現(xiàn)代分析技術(shù)，從蜂膠中分析鑒定出100多種化學(xué)成分[ ]，主要有黃酮類化合物(包括黃酮、黃酮醇和黃烷醇)、萜烯類、有機(jī)酸類化合物、醛、醇類化合物等。蜂膠的最大特點(diǎn)是含有豐富的黃酮類和萜烯類化合物。蜂膠中的黃酮類化合物具有抗菌、殺毒、消炎、止痛、降血脂、促進(jìn)組織再生和增進(jìn)機(jī)體免疫能力等功效[ ]。鑒于黃酮類化合物在蜂膠中有效成分中占的比例較高，且含量測(cè)定容易，目前常用黃酮類化合物的含量來(lái)代表蜂膠有效成分的含量，因此黃酮類化合物含量是蜂膠制品最主要的質(zhì)量控制指標(biāo)[ 、 ]。復(fù)雜的化學(xué)成分，決定了蜂膠有廣泛的生物學(xué)作用，如廣譜抗病毒、抗細(xì)菌、抗霉菌、抗腫瘤、消炎、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能和促進(jìn)組織再生等作用[ ] [ ]。


3. 蜂膠的免疫增強(qiáng)作用
3.1 總體作用
蜂膠的免疫增強(qiáng)功能表現(xiàn)在免疫防御、免疫自穩(wěn)、免疫監(jiān)視三個(gè)方面，即機(jī)體對(duì)病菌、病毒的抗感染能力，識(shí)別和清除自身衰老組織細(xì)胞的能力，殺傷和清除異常突變細(xì)胞、抑制惡性腫瘤生長(zhǎng)的能力。
蜂膠本身雖不具有抗原特性，但它具有免疫增強(qiáng)作用，能增加抗體產(chǎn)生，使血清蛋白和丙種球蛋白含量提高，提高白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞吞噬能力，提高抗體的特異性和非特異性免疫力[ ]。
3.2 研究證據(jù)
上世紀(jì)60年代，蘇聯(lián)喀山獸醫(yī)學(xué)院就通過(guò)對(duì)大、小白鼠，家兔，豬，牛犢的試驗(yàn)證明，應(yīng)用蜂膠或配合抗原引入機(jī)體能增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能�；郀柦鹉鹊鹊茸C明，蜂膠具有明顯增高血清丙種球蛋白(免疫球蛋白)的效應(yīng)，同時(shí)具有活化補(bǔ)體，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞活力的作用。此后，她們用腸炎沙門氏菌制備的完全抗原免疫大白鼠，分組觀察證明，蜂膠合并抗原注入動(dòng)物機(jī)體，能引起較強(qiáng)的漿細(xì)胞反應(yīng)和刺激局部與遠(yuǎn)區(qū)淋巴結(jié)的抗體生成105106。用蜂膠作為佐劑注射的大白鼠，其局部淋巴細(xì)胞增生比用皂素作佐劑的或單純抗原組強(qiáng)3.7-6倍，蜂膠組大白鼠血清凝集素滴度比其其它組高3-4倍。巴拉魯金納指出單用沙門氏菌抗原免疫家兔時(shí)，在免疫后7天，血清中己經(jīng)能檢測(cè)出抗體，2l天抗體滴度達(dá)到最高峰，此后降至維持水平，此水平至少維持65天。
沈志強(qiáng)等以蜂膠為佐劑成功研制禽霍亂蜂膠滅活疫苗，免疫7天后產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)免疫力，近期保護(hù)率達(dá)10%，免疫期長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月以上。并在以后的研究中證明，蜂膠可增強(qiáng)機(jī)體免疫反應(yīng)、激活與保護(hù)免疫器官，是優(yōu)良的免疫佐劑，他認(rèn)為蜂膠對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)具有廣泛的作用，既可增強(qiáng)體液免疫功能也可增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，對(duì)胸腺、脾臟及免疫系統(tǒng)具有有益的影響，能促進(jìn)抗體的生成，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力和自然殺傷性細(xì)胞的活性。
Dimov等[ ]研究了蜂膠水溶性物質(zhì)的免疫調(diào)節(jié)作用，發(fā)現(xiàn)對(duì)金黃色葡萄球菌和白色念球菌感染具有良好的免疫調(diào)節(jié)作用。
Ivanovska等對(duì)蜂膠的機(jī)體體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了一系列的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn):苯乙烯酸和咖啡酸對(duì)紅血球溶解具有良好的抑制作用，無(wú)論對(duì)機(jī)體損傷造成的免疫功能低下還是本身原有的免疫功能缺乏都有很好的效果；其對(duì)革蘭氏陰性菌感染的免疫調(diào)節(jié)主要是通過(guò)提高巨噬細(xì)胞活力，增強(qiáng)其吞噬功能來(lái)完成的。
李淑華等用單克隆抗體技術(shù)檢測(cè)試驗(yàn)小鼠藥物處理前后T細(xì)胞總數(shù)及亞群變化，并用MTT法檢測(cè)T細(xì)胞增殖研究，結(jié)果顯示，蜂膠乙醇提取物（EEP）能促進(jìn)Con A誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖，增加T細(xì)胞總數(shù)并調(diào)整T細(xì)胞亞群紊亂，表明EEP對(duì)免疫功能低下小鼠細(xì)胞免疫功能具有免疫刺激和調(diào)節(jié)作用。
于曉紅等試驗(yàn)結(jié)果證明，蜂膠能夠增強(qiáng)免疫功能低下小鼠的抗體生成細(xì)胞功能，提高溶血素含量，增強(qiáng)單核吞噬細(xì)胞功能[ 、 ]。


4. 在佐劑中的作用
4.1 佐劑概述
佐劑“adjuvant”一詞來(lái)自拉丁文“adjuvare”，意思是幫助，在免疫學(xué)中是指與抗原混合后注射動(dòng)物可增加抗原的免疫原性，起輔佐抗原的作用，并增強(qiáng)或調(diào)節(jié)抗原體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答。佐劑通過(guò)激活抗原遞呈細(xì)胞(APC)以表達(dá)共刺激分子和免疫效應(yīng)因子，沒(méi)有佐劑，純化蛋白或基因工程肽等弱抗原不能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生有效的免疫保護(hù)反應(yīng)。世界范圍內(nèi)有多個(gè)實(shí)驗(yàn)室都在尋找理想的抗原佐劑[ ]。理想的佐劑不僅能增強(qiáng)免疫反應(yīng)，還能使宿主獲得最佳的保護(hù)性免疫。

4.2 傳統(tǒng)佐劑
4.2.1 鋁膠佐劑
鋁鹽佐劑包括硫酸鉀鋁、磷酸鋁、按明礬、鉀 ……（未完，全文共9435字，當(dāng)前僅顯示2577字，請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏《畢業(yè)論文：蜂膠的免疫增強(qiáng)作用及在疫苗佐劑中的應(yīng)用綜述》）