畢業(yè)設(shè)計課題：蘆柑皮黃酮類化合物的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定

大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計)開題報告
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課題名稱 蘆柑皮黃酮類化合物的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定

1、本課題的的研究目的和意義：
黃酮類化合物常以游離態(tài)或與糖結(jié)合成苷的形式存在。國內(nèi)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)黃酮家族包括黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇、查耳酮、雙黃酮、異黃酮、二氫異黃酮、黃酮苷等存在于水果、蔬菜和植物中，有很好的抗氧化、抗炎和抗病毒作用;研究證實從植物提取的黃酮類化合物有多種藥理作用，包括①清除_基、抑制細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化;降低過氧化脂質(zhì)(LPO) 含量、提高紅細(xì)胞超氧化物歧化酶(SOD)活性;②對心肌缺血引起的心功能紊亂有保護(hù)作用，增加冠脈血流及頸動脈流量、抗心肌及腦缺血;③防止血栓形成和抗血小板聚集;④對腦部血流循環(huán)及腦細(xì)胞代謝有改善和促進(jìn)作用;⑤降低血甘油三酯和提高高密度脂蛋白的含量。經(jīng)過長期的臨床使用，其療效肯定，使用安全性較高，已廣泛應(yīng)用于心血管疾病
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本高，且提取物中烷基酚的含量較高，目前仍不能進(jìn)行規(guī)模化生產(chǎn)。相對而言，超聲波法與微波輔助提取法操作簡單易行，提取時間短，可考慮應(yīng)用于規(guī)�；I(yè)生產(chǎn)。此外，利用對黃酮的吸附和解吸能力，分離精制黃酮也取得了很好進(jìn)展。同時，一些新興黃酮提取技術(shù)的研究如半仿生提取法、酶解法等也處于探索實驗階段，有待進(jìn)一步深入研究。
2.2 黃酮的分離方法：
由于黃酮化合物的性質(zhì)不同，其分離原理也不同�？梢愿鶕�(jù)其極性、分子量、酸堿性。也可以根據(jù)分子中某些特殊結(jié)構(gòu)，設(shè)計特定的分離方法，目前使用較多且成熟的方法的是色譜法和pH梯度萃取。
2.2.1.色譜法
根據(jù)黃酮化合物的性質(zhì)不同，可以先用不同的溶劑進(jìn)行初步的分離。通常根據(jù)溶劑極性的大小，依次用石油醚，氯仿，乙酸乙酯，正丁醇提取，進(jìn)一步分離的方法有柱色譜法，薄層制備色譜法和高效液相色譜法(HPLC)等。
柱色譜法可以分為硅膠色譜、聚酰胺柱色譜和葡聚糖凝膠柱色譜。硅膠柱色譜法應(yīng)用范圍最廣，非極性與極性化合物都能用，適用于分離黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮醇類、二氫黃酮類、異黃酮類、黃酮苷元類。聚酰胺柱色譜分離黃酮類化合物，聚酰胺是較為理想的吸附劑，其吸附強(qiáng)度主要取決于黃酮類化合物分子中羥基的數(shù)目、位置及溶劑與黃酮類化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵締合能力的大小。葡聚糖凝膠(Sephade* gel)柱色譜，主要使用兩種型號的凝膠：Sephade* G型和Sephade* LH20型，凝膠對黃酮類化合物的吸附程度取決于游離羥基的數(shù)目。
薄層制備色譜法屬于固—液吸附色譜，兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點，是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的分離方法。
高效液相色譜法又稱“高壓液相色譜”，是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而還實現(xiàn)對樣品的分析。
.2.2.2. pH 梯度萃取
pH梯度萃取適合分離酸性強(qiáng)弱不同的游離黃酮類化合物。將混合物溶于有機(jī)溶劑(如乙醚)，依次用5 % NaHCO3(萃取7,4’-二羥基黃酮)、5 %的Na2CO3(萃取7-羥基黃酮或4’-羥基黃酮)、0.2 %NaOH(萃取一般酚羥基黃酮)、4 % NaOH(萃取5-羥基黃酮)萃取而使其分離。

3、 本課題的主要研究內(nèi)容（提綱）和成果形式：
以蘆柑皮為研究對象，對蘆柑皮中黃酮類化合物進(jìn)行分離和純化，利用紫外光譜、質(zhì)譜、氫譜、碳譜等有效手段對黃酮類化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，研究其性質(zhì)，為進(jìn)一步開發(fā)其藥用價值和工業(yè)價值提供實驗依據(jù)。實驗成果以單一黃酮類化合物的波譜特征和結(jié)構(gòu)式展現(xiàn)。
4、擬解決的關(guān)鍵問題：
1.如何從蘆柑皮的提取物中分離總黃酮類化合物
2.如何進(jìn)一步分離純化黃酮類化合物
3.怎樣得到單一的黃酮類化合物
4.黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)解析
5、研究思路、方法和步驟：
把總的從蘆柑皮中提取的總黃酮類化合物用大孔樹脂分離法進(jìn)行預(yù)分離，分離得到的產(chǎn)物進(jìn)行點板分析，自然晾干后樣品和硅膠混合拌樣，用硅膠柱進(jìn)行進(jìn)一步分離，經(jīng)過點板分析樣品的純度。樣品過濾后用高效液相色譜分析制備單一的黃酮類化合物，并根據(jù)液相色譜圖進(jìn)行化合物結(jié)構(gòu)解析。
6、本課題的進(jìn)度安排：
（1）2011.9-2011.10 查找相關(guān)文獻(xiàn)資料，確定實驗方案，預(yù)實驗等實驗準(zhǔn)備工作
（2）2011.11-2011.12 蘆柑皮中黃酮類化合物的與分離
（3）2011. ……（未完，全文共3784字，當(dāng)前僅顯示1911字，請閱讀下面提示信息。收藏《畢業(yè)設(shè)計課題：蘆柑皮黃酮類化合物的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定》）