醫(yī)學(xué)論文：TFPI-2與急性髓細(xì)胞白血病的研究進(jìn)展

醫(yī)學(xué)論文：TFPI-2與急性髓細(xì)胞白血病的研究進(jìn)展

Research progress of the relationship between TFPI-2 and the acute myelocytic leukemia
【摘要】：組織因子途徑抑制物2 ( t issue factor pathway inh ibitor-2, TFP I-2) 是一種絲氨酸蛋白酶抑制物, 可抑制包括纖溶酶、胰蛋白酶、MM P s 在內(nèi)的多種蛋白酶, 其在纖溶、傷口愈合、血管生成, 以及腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移等一系列病理生理過(guò)程中發(fā)揮重要作用 。急性髓細(xì)胞白血病，臨床上表現(xiàn)為貧血、發(fā)熱、出血、感染。預(yù)后不良。本文就TFPI-2的結(jié)構(gòu)及調(diào)控，TFPI-2與急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞的凋亡、血管生成、凝血機(jī)制等方面的研究進(jìn)展做一論述。
【Abstract】Tissue factor pathway inhibitor-2 ( TFPI-2) is a matri*-associated Kunitz-type domains serine protinase inhibitor,it negatively regulates the enzymatic activity of trypsin and plasmin and a variety of protease includ MMPS.Acute myelocytic leukemia is hard to cure, which clinical manifestation are anemia and fever and bleeding and infection .This paper is talk about the structure and regulation of TFPI
……（新文秘網(wǎng)http://jey722.cn省略1230字，正式會(huì)員可完整閱讀）……　
腫瘤細(xì)胞的生存、侵襲、及內(nèi)外擴(kuò)張起重要作用[10].有研究報(bào)告示：TFPI-2有抗侵襲作用，通過(guò)抑制血纖維蛋白溶酶（激活蛋白酶細(xì)胞外基質(zhì)的降解。）和腫瘤細(xì)胞侵襲。一些腫瘤細(xì)胞穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染了TFPI-2基因后不易被侵襲，[ 16-17]盡管許多腫瘤細(xì)胞是無(wú)性生殖，而且腫瘤細(xì)胞巨大的異型性表示腫瘤增值與基因和外部因素都有關(guān)系，與環(huán)境還相關(guān)，細(xì)胞因子促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，表達(dá)細(xì)胞特有體征。[ 18]現(xiàn)在假設(shè)，基因不同和DNA超甲基化將導(dǎo)致TFPI-2含量在腫瘤細(xì)胞中下降。
2　TFP I-2的組織來(lái)源和組織分布
TFP I -2是存在于正常人血漿中的單鏈糖蛋白，由多種細(xì)胞分泌，大部分來(lái)自胎盤(pán)合胞體滋養(yǎng)層和ECM中的內(nèi)皮細(xì)胞。內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌，成纖維細(xì)胞、膀胱上皮細(xì)胞也可分泌。[19-20]TFP I-2 廣泛分布于人類(lèi)肝、胰腺、腎、心、骨骼肌、前列腺和胎盤(pán)組織, 以及臍靜脈上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等。其抑制胰蛋白酶，血纖維蛋白溶酶、糜蛋白酶、組織蛋白酶G、.血漿激肽釋放酶和組織Ⅷ釋放物。而對(duì)UPA,TPA,凝血酶素作用不明顯。有研究報(bào)告表明，它在一些侵襲性腫瘤中呈低表達(dá)。包括絨毛膜癌，神經(jīng)膠質(zhì)瘤，前列腺癌，人黑色素細(xì)胞瘤和骨纖維肉瘤。TFPI-2在正常血漿中濃度為225 mmo l/L , 大部分與脂蛋白結(jié)合, 包括低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和脂蛋白(a).在體內(nèi)TFP I22的分布70%～75%與ECM結(jié)合,這些結(jié)果目前已經(jīng)通過(guò)電子顯微鏡觀(guān)測(cè)到; 25%～30%與細(xì)胞結(jié)合,只有極少量(0～2% )存留在某些特殊的介質(zhì)中 。在人體循環(huán)的血液中,只有極少的TFP I-2(13～15pmol)能被檢測(cè)到,當(dāng)靜脈注射肝素后,血中的TFPI-2的含量會(huì)明顯的提高[ 20-23]
3 TFPI-2與一些惡性腫瘤侵襲性關(guān)系研究
3.1 乳腺腫瘤 Yifeng Lin[ 24--25]等發(fā)現(xiàn)TFPI-2的MRNA和蛋白質(zhì)在乳腺癌MDA-MB-435細(xì)胞株中檢測(cè)不出，進(jìn)一步研究TFPI-2在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)途徑，TFPI-2的1.5Kb段被克隆，并且檢測(cè)TFPI-2基因的不同片段，啟動(dòng)子的熒光素酶的活動(dòng)不被啟動(dòng)子區(qū)域點(diǎn)突變影響，而受基因片段缺失的影響。數(shù)據(jù)分析，TFPI-2啟動(dòng)子區(qū)域有個(gè)潛在的KLF6結(jié)合位點(diǎn)，通過(guò)亞硫酸氫鈉修飾序列顯示出來(lái)。[26]TFPI-2啟動(dòng)子區(qū)域的CpG 島結(jié)構(gòu)在MDA-MB-435細(xì)胞中被甲基化，最后用EMSA 和ChIP檢測(cè)，CpG島結(jié)構(gòu)在KLF-6結(jié)合位點(diǎn)甲基化限制KLF6與TFPI-2啟動(dòng)子區(qū)域的結(jié)合。FPI-2啟動(dòng)子區(qū)域的CpG 島結(jié)構(gòu)在乳腺癌細(xì)胞株出現(xiàn)甲基化，而整個(gè)啟動(dòng)子區(qū)域DNA的甲基化引起TFPI-2基因的通過(guò)沒(méi)有活性的染色體結(jié)構(gòu)表達(dá)，TFPI-2基因在乳腺癌細(xì)胞中的低表達(dá)是由于KLF -6結(jié)合位點(diǎn)的CpG二核苷酸異常甲基化。
3.2 神經(jīng)母細(xì)胞瘤 美國(guó)伊利諾伊州大學(xué)醫(yī)學(xué)院發(fā)現(xiàn)TFPI-2是一種大量存在于ECM中的蛋白酶類(lèi)抑制物，并且在正常細(xì)胞中高表達(dá)，但是在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中低表達(dá)或者不表達(dá)。[27]研究者使用重組腺相關(guān)病毒載體將TFPI-2轉(zhuǎn)染到神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞U-251中，提高TFPI-2在神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的含量將有效地阻止腫瘤細(xì)胞的增值，血管生成和腫瘤侵襲。初步研究表明TFPI-2通過(guò)蛋白酶介導(dǎo)的信號(hào)通路導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。[27]TFPI-2可通過(guò)細(xì)胞內(nèi)外caspase介導(dǎo)的促凋亡信號(hào)通路促使U-251細(xì)胞凋亡。通過(guò)TUNEL和FACS方法檢測(cè)轉(zhuǎn)染TFPI-2的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞U-251，檢測(cè)蛋白酶3和蛋白酶9顯示被轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞增強(qiáng)凋亡。
3.3 宮頸癌 Qiao Zhang，等發(fā)現(xiàn)隨著宮頸癌細(xì)胞的增長(zhǎng)，TFPI-2值曾下降趨勢(shì)。他們的研究包括12組宮頸鱗狀上皮細(xì)胞，48組宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變細(xì)胞。[28]68組宮頸癌細(xì)胞，用免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)TFPI-2, Ki-67和VEGF。AI用TUNEL檢測(cè)，結(jié)果顯示隨著宮頸癌細(xì)胞的增值TFPI-2的含量下降，并且和FIGO水平，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，HPV感染有關(guān)。另外TFPI-2的量與AI曾正向關(guān)系(P = 0.004)。相反的，TFPI-2的量與VEGF 或者 MVD曾負(fù)向關(guān)系（p < 0.001)。[29]TFPI-2的含量與宮頸癌細(xì)胞凋亡和血管新生密切相關(guān)。TFPI-2將在宮頸癌的發(fā)展中起抑制作用。
3.4 白血病 許云等應(yīng)用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將TFPI-2基因?qū)肴税籽〖?xì)胞株K562中，采用G418選出帶有表達(dá)載體的細(xì)胞，形成K562，K562-V(空載體)，K562-T組。分別用PCR和Western blot 檢測(cè)，PCR結(jié)果示K562-T組的MRNA明顯高于其他兩組，Western blot結(jié)果示：K562-T組有TFPI-2蛋白表達(dá)，其余兩組未見(jiàn)蛋白表達(dá)�？梢�(jiàn)TFPI-2的表達(dá)能使K562細(xì)胞生長(zhǎng)速度減慢，生長(zhǎng)受到抑制，并且能夠減弱K562細(xì)胞的侵襲能力，推測(cè)TFPI-2有抗腫瘤效應(yīng)，能抑制腫瘤的增值和侵襲。

TFPI-2抑制惡性腫瘤侵襲性的機(jī)制探討
目前TFP I-2在抑制惡性腫瘤侵襲性的作用還沒(méi)有準(zhǔn)確完整結(jié)論,但是在幾個(gè)方面已經(jīng)有了使人感興趣的結(jié)果，值得進(jìn)一步研究。
4.1 抑制MMPS： MMPS是一個(gè)蛋白酶家族，其作用是使結(jié)締組織蛋白分解。能降解血管基底膜和內(nèi)皮細(xì)胞的胞外基質(zhì)，使內(nèi)皮細(xì)胞從血管壁脫落下來(lái)而形成新的血管。MMPS的活性受到多水平調(diào)控，包括基因表達(dá)、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，TFPI-2等�！�30】已有資料證明，多種惡性腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移與MMP的過(guò)度表達(dá)有關(guān)。MMP-2，MMP-9，MMP-7，MMP-14在人類(lèi)胃癌中過(guò)度表達(dá)。特異性MMPS抑制因子可以恢復(fù)正常蛋白水解活性的平衡，TFP I-2通過(guò)抑制纖溶酶,間接抑制MMPs，從而阻止腫瘤的進(jìn)一步發(fā)展及轉(zhuǎn)移。
4.2 抑制VEGF的生成：血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）不論對(duì)于正常組織還是對(duì)于腫瘤組織內(nèi)的血管生成均有非常重要的作用。促使血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生有絲分裂、促進(jìn)一些蛋白酶類(lèi)重新改造細(xì)胞外結(jié)構(gòu)以及增加血管的_性。胰腺癌中VEGF的表達(dá)增加。VEGF通過(guò)旁分泌及自分泌機(jī)制促進(jìn)腫瘤發(fā)展。在人和動(dòng)物模型中，VEGF的表達(dá)水平越高，預(yù)后越差。纖維肉瘤細(xì)胞株(HT21080)分泌的TFP I-2可以下調(diào)與血管新生有關(guān)的基因VEGF�！�31】
……（未完，全文共14524字，當(dāng)前僅顯示3455字，請(qǐng)閱讀下面提示信息。收藏《醫(yī)學(xué)論文：TFPI-2與急性髓細(xì)胞白血病的研究進(jìn)展》）